MICRO-LED120 荧光成像LED光源
利用荧光分子标记细胞样品中某些特定结构或成分，用波长较短的光激发这些荧光分子使其处于高能态，再对其退激过程中所发射的波长相对较长的荧光进行显微成像，即为荧光显微术。采用该技术，不仅可以克服普通光学显微术难以直接对无色透明的细胞样品进行成像的缺点，更重要的是还能通过标记细胞中特定的结构或者分子、离子实现“功能成像”。由于离焦干扰等原因，普通宽场荧光显微术分辨率并不高，但利用一些特殊技术可以显著提高分辨率和对比度。
LED120是荧光成像应用的紧凑、易用型白色 LED 光源。通过直接耦合，凭借宽的荧光激发光谱，可提供卓越的 LED 照明表现和针对样本的均匀照明区域，可采用手动和 TTL 三种方式控制，针对任何仪器配置都能提供便利的控制选项，从基本操作到全自动操作。LED 保固使用寿命长达 20,000 小时，无需更换灯泡或光导管组件，几乎不需要任何维护，而且采用紧凑型设计，所需的放置空间极小。
LED荧光光源在荧光成像系统中因其小巧、长寿命、低热量输出和对生物细胞较低的光毒性而受到青睐。与汞弧灯相比，LED不仅减少了对环境的影响（无汞），而且降低了细胞的光毒性和光漂白效应，有利于长期细胞成像。此外，LED光源能够快速开关，保证了每次曝光时光剂量的可重复性，对于定量分析至关重要。
功能和优势
| 功能 |
益处 |
| LED 技术 |
高效、稳定、即时开/关、使用寿命长 |
| 白光激发 |
DAPI、CFP、GFP/FITC、YFP、mCherry/Texas Red 和 Cy5 等常用荧光激发 |
| 直接耦合 |
高功率激发 |
| 多种控制方式 |
操作简单 |
| 占用空间小 |
*小的空间要求；使用较少的台顶面积 |
| 经过优化的热管理 |
实现*大的 LED 输出、寿命、稳定性和可靠性 |
| 耦合光学元件 |
采用*高性能的耦合光学元件，可提供高效的光学输出和均匀度 |
产品特点
1.更高亮度的LED光源：新品采用了更高亮度的LED光源，能够在保证光谱范围小的同时，提供更强的荧光激发能力。这使得荧光图像更加明亮、清晰，便于科研工作者捕捉和观察样本的细微变化。
2.更精确的电动控制：通过优化电动控制系统，新品实现了更加精确的荧光通道切换和亮度调节。用户可以轻松地在明场和荧光观察方式之间切换，同时根据不同实验需求调节亮度，以获得*佳的图像效果。
3.更多样化的滤光片选择：为了满足不同荧光染料的观察需求，新品提供了更多样化的滤光片选择。用户可以根据实验需求选择合适的滤光片组合，以获得更加准确的荧光图像。
4.更人性化的操作界面：新品升级了7英寸触控液晶屏控制界面，使得用户操作更加便捷、直观。用户可以通过简单的触摸操作实现通道切换、亮度调节等功能，大大提高了工作效率。
5.更稳定的外置电源箱： 为了确保电源的稳定性和安全性，新品采用了更加稳定的外置电源箱设计。这不仅保证了光源的稳定输出，还减少了显微镜上的空间占用，使得用户更加方便地操作和调整。
技术规格
| 波长范围 |
370-700nm |
| 波长范围 |
370-700nm |
| 电源 |
通用输入 100-240VAC, 50/60Hz |
| 功耗 |
150W |
| LED 开/关响应时间 |
85µs TTL；1ms USB |
| 控制方式 |
ON/OFF – TTL 兼容 |
| |
speedDIAL |
| |
RS-232 指令（SDK 可用 |
| |
USB |
| 尺寸 – 灯头 |
100 mm x 135 mm x 110 mm (B x H x T) |
| 尺寸 – 控制器 |
180 mm x 110 mm x 230 mm (B x H x T) |
| 重量 |
3,4 kg (7.5 lb) |
| 认证 |
RoHS, CE |
| 质保 |
LED – 20,000 小时； |
荧光团
| 荧光团 |
荧光团波长 (nm) |
| DAPI |
385nm |
| CFP |
435nm |
| GFP/FITC |
470nm |
| YFP |
510nm |
| TRITC/Cy3/RFP/mCherry |
560nm |
| MitoTracker® Red CMXROS |
580nm |
| Cy5 |
640nm |
滤光片推荐
| Fluorophor |
Semrock滤光片 |
Chroma滤光片 |
| DAPI |
DAPI 5060-C |
49028 |
| CFP |
CFP-2432C |
49001 |
| CFP/YFP FRET |
FRET CFP/YFP-C |
89002 |
| FITC |
FITC-5050-A |
49002 |
| GFP |
GFP-4050B |
mCherry |
| mCherry-B |
49008 |
Cy5 |
| Cy5-4040C |
49006 |
|
荧光显微术（仅供学习）
1.共聚焦激光扫描显微术
共聚焦激光扫描显微术（Confocal Laser Scanning Microscopy, CLSM）的基本原理是利用一对共轭针孔进行“空间滤波”，将焦平面以外的杂散光滤除以提高纵向分辨率，实现非侵入式的“光学切片”。CLSM的横向分辨率约为100-200 nm，纵向分辨率可达500 nm，大大优于普通非共焦方式的荧光显微术；同时共焦针孔的应用也地提高了图像信噪比。这些优点使CLSM被广泛应用于细胞生物学的研究，尤其是亚细胞层次空间结构和功能的研究。
然而CLSM采用的是逐点扫描的成像方式，成像速度受到限制。近年来发展起来的转盘式共聚焦显微术（Spinning Disk Confocal Microscopy, SDCM）仍利用CLSM的共焦针孔原理，但由于采用高速旋转的转盘实现了非常多焦点的近似面照明，所得荧光可以采用CCD采集，在保持图像质量达到传统CLSM水平的同时成像速度可达视频要求，成为活细胞内单分子荧光成像的有力工具。
共聚焦激光显微术（左）和转盘式共聚焦显微术（右）原理示意图
2.全内反射荧光显微术
当一束光从光密介质射向光疏介质时，并且入射角大于临界角时，将发生全内反射（Total Internal Reflection, TIR）。由于光的波动效应，此时仍会有少量光能量穿透界面并沿着平行界面的方向传播，称为隐失波（Evanescent Wave）全内反射荧光显微术（TIR Fluorescence Microscopy, TIRFM）就是利用这种隐失波来激发样品荧光的，由于其穿透深度一般只有100-200 nm，因而纵向分辨率和图像信噪比均大大提高。常见的TIRFM有棱镜型和物镜型两类。TIRFM一般应用于研究细胞膜或膜内附近区域的动态过程，如信号转导等。
棱镜型（左）和物镜型（右）全内反射荧光显微术示意图
电光源显微镜的照明光源，主要有卤素灯（halogen lamp）、汞灯（mercury vapor arc-discharge lamp）、氙灯（xenon short arc plasma lamp）和发光二极管（light-emitting diodes，LED）等类型。如图1，其中，卤素灯的连续光谱主要分布在可见光的暖色区，是传统生物显微镜的主要照明光源。卤素灯使用时，必须配备蓝色滤光片矫正光色。汞灯为非连续光谱，主要发射光谱分布在紫光和绿光附近，波长较短，能量高，一般用于荧光显微镜的激发照明。氙灯与汞灯相比，虽然红外部分占比较高，但可见光区的连续性较好，对需要多色荧光激发的实验更适合。LED光源也非连续光谱，但在多个光色范围内都有发射光谱分布，并具有发热少、寿命长等优势，故可应用于多种类型光学显微镜的照明。在明场显微镜中，LED光源的长寿命和低发热更显优势。
